随着生物医学的发展，DNA甲基化（DNA methylation）标志物在癌症诊断、治疗选择及预后评估中的重要性日益凸显。在现代肿瘤治疗领域，肿瘤 DNA 甲基化标志物作为一种重要的生物标志物，在癌症的早期诊断、治疗选择及预后评估中扮演着越来越关键的角色。

图1.正常细胞与肿瘤细胞DNA甲基化的状态

DNA 甲基化是一种 DNA 的共价修饰，具体是指DNA 甲基转移酶（DNA methyltransferases，DNMTs）将甲基加到 DNA CpG 序列中胞嘧啶的 5'碳位，形成 5⁃甲基胞嘧啶的过程。成簇的 CpG被称为 CpG岛（CpG islands，CGIs），主要位于结构基因的启动子和第一外显子区域。DNA 甲基化标志物是癌细胞中的 DNA异常甲基化改变，这种异常甲基化贯穿于癌症发生和发展的全过程。

肿瘤DNA甲基化标志物检测及临床应用专家共识（2024版）指出：与传统的肿瘤标志物相比，DNA甲基化标志物具有更早期、更无创、更精准等优点。因此，可以通过非侵入性方式获得的痰液、血浆、血清或尿液等样本进行 DNA 甲基化标志物检测。一些DNA甲基化异常发生在肿瘤形成的初始阶段，通过检测与肿瘤发展相关的甲基化标志物，可以辅助癌症早期诊断、评估进展风险。DNA 甲基化标志物甲基化水平的增加或降低与肿瘤预后密切相关，可用于治疗或根治性手术后评估肿瘤微小残留病灶（MRD）和监测复发。此外，DNA甲基化标志物还可作为化疗敏感性的标志，某些特定基因的甲基化可能预示着癌症对治疗的反应，可用于判断化疗药物的疗效，以更好地指导治疗方案。

DNA甲基化标志物检测技术方法

图2.DNA甲基化标志物检测技术方法

甲基化建库试剂盒搭配MGI测序接头一直以来为技术难点，MGI 测序接头与 Illumina Y 字型接头类型存在很大的差异，MGI 测序接头 Linear adapter 与 Bubble adapter 长度不同但两端互补配对，因此会产生小泡状结构，小泡状结构会降低与单链DNA的连接效率，影响文库产出和检测的灵敏度。

Hieff NGS^® Methyl-seq DNA Library Prep Kit for MGI 是针对 MGI 测序平台专业开发设计的新一代 DNA 甲基化建库试剂盒，可以满足甲基化转化后10 pg~250 ng DNA 样本建库。该试剂盒可兼容短至 40 bp 的 DNA 样本，适应于先转化后建库。

图3.不同样本投入量下的文库产量和下机数据基本指标

相同的样本投入量，酶法转化搭配MGI平台甲基化建库试剂12226的文库浓度和数据质量更高，插入片段更长，文库丰富度更高。

图4.亚硫酸氢盐转化和酶法转化后的文库产量和下机数据基本指标

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